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RNA蛋白共沉淀(RIP)檢測
作者:管理 發(fā)布時間:2022-06-23 17:02:54
RNA Immunoprecipitation(RIP)是研究細胞內(nèi) RNA 與蛋白結(jié)合的技術(shù),是了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動態(tài)過程的有力工具。RIP 利用特異性抗體對目標蛋白進行捕獲,實現(xiàn)目標蛋白-RNA 復(fù)合物的富集,再通過對復(fù)合物中蛋白和 RNA 的檢測和分析,探索分子間相互結(jié)合關(guān)系。分離復(fù)合物中的 RNA,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄或構(gòu)建 cDNA 文庫,最后利用基因特異性分析技術(shù)(PCR、qRT-PCR)或高通量分析技術(shù)(高通量測序、基因芯片),分析復(fù)合物中 RNA 的類型及多少;分離復(fù)合物中的蛋白, 通過 Western blot 或質(zhì)譜等方法,還可以用來做質(zhì)控、檢測目標蛋白抗體質(zhì)量以及研究與目標蛋白結(jié)合的其他互作蛋白。