轉(zhuǎn)錄通常發(fā)生在生物體內(nèi)，如果我們將含有RNA轉(zhuǎn)錄酶、NTP等條件，在體外無細(xì)胞系統(tǒng)中，用DNA作為模板，模仿體內(nèi)轉(zhuǎn)錄過程后生成RNA，這樣的技術(shù)則能夠控制轉(zhuǎn)錄的基因、轉(zhuǎn)錄的過程和轉(zhuǎn)錄后RNA的用途，該方法被稱為體外轉(zhuǎn)錄法。

轉(zhuǎn)錄模板必須滿足：1、在基因組全長克隆過程中，在正向引物5’端添加T7啟動子序列；2、以T7啟動子作為體外轉(zhuǎn)錄啟動子，在啟動子后面靶位序列連續(xù)帶有3個G，轉(zhuǎn)錄效率最高；3、在正向引物’端添加一個帽子G，有利于提高體外轉(zhuǎn)錄RNA分子的侵染活性。