載體構(gòu)建：將特定序列（如基因CDS區(qū)，miRNA，lncRNA等）進(jìn)行克隆獲得，并將其構(gòu)入特定的表達(dá)載體（pcDNA3.0等），在轉(zhuǎn)染劑的輔助下，將載體轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)在宿主細(xì)胞內(nèi)目的片段大量表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的過表達(dá)的過程。

定點(diǎn)突變：根據(jù)設(shè)計(jì)的要求合成覆蓋突變位點(diǎn)的雙向引物，通過PCR向目的DNA片段中引入所需的變化，如堿基的插入、刪除、替換等，改變對(duì)應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能。定點(diǎn)突變能迅速、高效的提高DNA所表達(dá)的目的蛋白的性狀及表征，是基因研究工作中一種非常有用的手段。 實(shí)驗(yàn)原理：PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)突變是指通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質(zhì)粒）中引入所需變化（通常是表征有利方向的變化），包括堿基的添加、刪除、點(diǎn)突變等。定點(diǎn)突變能迅速、高效的提高DNA所表達(dá)的目的蛋白的性狀及表征，是基因研究工作中一種非常有用的手段。