1）石蠟切片

石蠟切片（paraffin section）組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法，而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。教學(xué)中，光鏡下觀察切片標(biāo)本多數(shù)是石蠟切片法制備的?；畹募?xì)胞或組織多為無色透明，各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差，在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組織腐敗，失去原有正常結(jié)構(gòu)，因此，組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡，而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)。

實(shí)驗(yàn)流程：

① 樣本接收：組織蠟塊。

② 實(shí)驗(yàn)步驟：將修整好的蠟塊置于石蠟切片機(jī)切片，厚3-4 μm。切片漂浮于攤片機(jī)40 ℃ 溫水上將組織展平，載玻片將組織撈起，60 ℃烘箱內(nèi)烤片。水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/span>

③ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：切好的玻片。

2）冰凍切片

冰凍切片（frozen section）是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進(jìn)行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡(jiǎn)便，且不經(jīng)過酒精、二甲苯等有機(jī)溶劑及高溫環(huán)境?？奢^好的保存脂類，酶類等易于溶解有機(jī)溶劑的物質(zhì)。對(duì)切片厚度的要求也可以更好的滿足。

主要應(yīng)用：

① 切片后常規(guī)的HE、IHC、IF染色等。

② 某些酶的顯示如ATP酶，β-半乳糖苷酶等。

③ 組織中的脂肪和脂類物質(zhì)，這常見于某些病例如脂肪瘤、脂肪肝等。切片后，經(jīng)過油紅O染色輔助判斷。

④ 神經(jīng)病理學(xué)技術(shù)中，要求一定厚度的腦組織切片等。

⑤ 對(duì)某些物質(zhì)所進(jìn)行的免疫熒光的研究，比如新鮮組織自發(fā)熒光，切片后觀察。

實(shí)驗(yàn)流程：

① 樣本接收：干冰保存運(yùn)輸?shù)男迈r組織或者常溫固定液保存的組織。

③ 實(shí)驗(yàn)步驟：新鮮組織取材并OCT包埋/固定組織經(jīng)過15%-30%梯度蔗糖溶液脫水后取材并OCT包埋，然后按指定要求切片。

③ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：低溫存放的完成的切片。