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雙熒光素酶報告實驗
作者:管理 發(fā)布時間:2022-06-23 17:34:33
利用熒光素酶與底物結合發(fā)生化學發(fā)光反應的特點,把感興趣的基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)化煙草,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣的調(diào)控元件的影響。為了減少內(nèi)在的變化因素對實驗準確性的影響,將帶有海腎熒光素酶基因(Rinilla luciferase)的質(zhì)粒作為對照質(zhì)粒與報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化,提供轉(zhuǎn)錄活力的內(nèi)對照,使測試結果不受實驗條件變化的干擾。